Introduzione
I Toll like receptor (TLRs) svolgono un ruolo essenziale nei processi di immunità innata attraverso il riconoscimento di patogeni e la produzione di citochine proinfiammatorie. In corso di sepsi, i TLRs sono iperespressi nelle cellule muscolari e mediano la comparsa di infiammazione, attivando le vie proteolitiche che portano ad atrofia e cachessia. In questo studio abbiamo valutato l’ipotesi che lo stato microinfiammatorio nel muscolo dei pazienti con CKD sia conseguente all’attivazione di specifici TLRs.
Materiali
Abbiamo valutato l’espressione di TLRs e il loro segnale nel muscolo di 26 pazienti con CKD stadio V (21M/5F, età 69±11 anni, eGFR 8±3 ml/min, PCR 15 (5-20) mg/l, HCO3- 24±1 mmol/l) e in 12 controlli (C). È stata analizzata l’espressione dei TLRs (TLR2, TLR3, TLR4), di Interleuchina 6, TNF-α, p-p65, p-JNK, p-JUN, p-AKT e p38.
Risultati
Nei pazienti con CKD l’espressione muscolare di TLR4 era aumentata (mRNA + 50%, p<0.05; proteina +50%, p<0.05) (Figura 1) mentre quella di TLR2 e TLR3 era normale (Fifura 2). Era presente un’upregolazione di NFkB p-p65 (+8 volte vs. C) (Figura 2) e del suo segnale a valle (TNF-α, IL6, p-p38 e pJNK) (p<0.03-0.01) (Figura 3). L’espressione proteica di TLR4 correlava inversamente con la funzione renale residua (r=-0.47, p<0.02), suggerendo che molecole progressivamente ritenute in circolo in corso di uremia attivino i TLR4. Abbiamo successivamente studiato gli effetti del siero uremico sull’espressione dei TLR in una linea di mioblasti (C2C12). Il siero uremico induceva un incremento dell’espressione di TLR4 (3-4 volte, p<0,01), NFkB p-p65, p-p38 e TNF-α (2-3 volte rispetto al basale, p<0,01). L’inibizione di TLR4 e di p-p38 aboliva l’overespressione dell’mRNA di TLR4 e del suo segnale a valle.
Conclusioni
Questi dati suggeriscono che il muscolo con il progredire dell’uremia riconosca molecole in grado di legare specifici TLR e di attivare una risposta trascrizionale NF-kB mediata, causando una repressione delle vie anaboliche e inducendo quelle cataboliche.