INTRODUZIONE
L’iperparatiroidismo secondario è una comune complicanza dell’insufficienza renale cronica end-stage. Il trattamento con dosi farmacologiche di calcitriolo può ridurre i livelli sierici di PTH, aumentando però i rischi potenziali di calcificazione vascolare.
Le calcificazioni vascolari sono state considerate per lungo tempo espressione di un processo passivo, legato principalmente all’aumento del prodotto CaxP. Numerose evidenze sperimentali e cliniche hanno dimostrato come le calcificazioni siano il risultato di un processo attivo e dinamico, che coinvolge diversi mediatori biochimici.
La fetuina-A è una proteina di fase acuta inversa sintetizzata a livello epatico in grado di inibire le calcificazioni vascolari. Essa rappresenta da sola più del 50% della capacità inibente del plasma umano sui processi di calcificazione. Scopo del nostro studio è stato quello di verificare se il trattamento con calcitriolo produce un effetto sull’espressione e la sintesi della fetuina-A a livello epatico. Il calcitriolo potrebbe interferire con l’equilibrio biochimico tra fattori favorenti e inibenti le calcificazioni in modo indipendente dall’aumento del prodotto CaxP osservato nella pratica clinica.
MATERIALI E METODI
Sono state allestite colture primarie di epatociti umani (FIGURA 1).
Le popolazioni cellulari sono state successivamente stimolate con concentrazioni crescenti di calcitriolo a
– 25,
– 50 e
– 100 nM per un periodo di incubazione di 48 ore.
Un’analisi quantitativa dell’mRNA della fetuina-A è stata effettuata tramite qRT-PCR a 24 e 48 ore, contemporaneamente è stata valutata l’espressione della proteina tramite western blotting.
Abbiamo considerato significativa una riduzione nell’espressione di mRNA e della proteina maggiore di 2 volte rispetto ai controlli.
RISULTATI
Una riduzione significativa nell’mRNA della fetuina-A (FIGURA 2) e della sua espressione proteica (FIGURA 3) è stata osservata a 48 ore dallo stimolo con calcitriolo con una risposta tempo e dose-dipendente.
CONCLUSIONI
In colture primarie di epatociti umani, la somministrazione di calcitriolo determina una riduzione significativa della sintesi di fetuina-A attraverso il legame con il VDR.
Il calcitriolo sembra interferire con l’equilibrio biochimico tra fattori favorenti e inibenti le calcificazioni, in modo indipendente dall’aumento del prodotto CaxP osservato nella pratica clinica.